液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因？

1、篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。

2、存在干擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子。

3、可能柱超載，減少進(jìn)樣量。

HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法是什么？

1、樣品量不足，解決辦法為增加樣品量

2、樣品未從柱子中流出。可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動相或柱子

3、樣品與檢測器不匹配。根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測器

4、檢測器衰減太多。調(diào)整衰減即可。

5、檢測器時(shí)間常數(shù)太大。解決辦法為降低時(shí)間參數(shù)

6、檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。

7、檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。

8、記錄儀測壓范圍不當(dāng)。調(diào)整電壓范圍即可。

9、流動相流量不合適。調(diào)整流速即可。

10、檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器，重作校正曲線。

怎樣解決做HPLC分析時(shí)，柱壓不穩(wěn)定，原因何在？

1、泵內(nèi)有空氣，解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣，對溶劑進(jìn)行脫氣處理；

2、比例閥失效，更換比例閥即可；

3、泵密封墊損壞，更換密封墊即可；

4、溶劑中的氣泡，解決的辦法是對溶劑脫氣，必要時(shí)改變脫氣方法；

5、系統(tǒng)檢漏，找出漏點(diǎn)，密封即可；

6、梯度洗脫，這時(shí)壓力波動是正常的。

出現(xiàn)峰展寬的原因？

1、樣品體積過大——用流動相配樣,總的樣品體積小于第一峰的15%。

2、在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展——進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散。

3、數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢——設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)。

4、檢測器時(shí)間常數(shù)過大——設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣第一峰半寬的10%。

5、流動相粘度過高——增加柱溫,采用低粘度流動相。

6、檢測池體積過大——用小體積池,卸下熱交換器。

7、保留時(shí)間過長——等度洗脫時(shí)增加強(qiáng)溶劑含量,也可用梯度洗脫。

8、柱外體積過大——將連接管徑和連接管長度降至最小。

9、樣品過載——進(jìn)小濃度小體積樣品。

簡單判斷比例閥是否內(nèi)漏？

設(shè)定泵使用一個單獨(dú)通路（A），打開Purge閥，流速5mL/min，提起其他溶劑瓶內(nèi)的溶劑過濾頭直至離開液面，觀察這些通路（B、C、D）內(nèi)的溶劑是否隨著流動，正常時(shí)均不應(yīng)流動。